Celigo全視野細胞掃描分析儀系統(tǒng)配備高質(zhì)量的明場通道和多這四個熒光通道,可提供高通量、全孔成像和定量數(shù)據(jù)分析,用于多種細胞實驗的檢測。Celigo全視野掃描分析儀常用于研究貼壁和懸浮細胞、3D腫瘤球、iPSC克隆和腫瘤干細胞克隆,Celigo兼容各種微孔板(從6孔到1536孔)和T培養(yǎng)瓶。
軟件以工作流程為基礎(chǔ),具有直觀的界面,可同時成像和分析;提供動態(tài)分析,例如多時間點拍攝生長追蹤,細胞群進行類流式設(shè)門分析和細胞群統(tǒng)計報告。可用彩色疊加圖顯示特定細胞群的細胞圖像。
Celigo可進行高速全自動化的成像,并可在復(fù)雜的樣本類型申對多種細胞類型進行量化分析。同時 提供了豐富的應(yīng)用程序選項,包括無標記細胞計數(shù)、基于融合率的細胞生長追蹤、殺傷實驗、細胞凋亡、細胞周期分析、細胞遷移、細胞侵襲實驗,以及其他細胞實驗分析(包括受體內(nèi)吞蛋白表達和檢測、磷酸化和吞噬作用)。
光學(xué)透鏡:全孔成像,每成像一次孔僅位移一次。
明場:提高孔邊緣的明場光學(xué)圖像對比度,消除孔邊緣的光學(xué)失真,精確識別孔里的每個細胞。
圖像圈定:明場和熒光算法,可精確圈定貼壁細胞和懸浮細胞。
對每個孔中的每個細胞進行計數(shù):獲取高分辨率的全孔圖像(在明場和熒光通道中),并對每個孔中的每個細胞進行計數(shù)。
自動保存高分辨率圖像:使用Celigo圖像可對結(jié)果進行驗證,所有孔的圖像均會自動保存。
腫瘤細胞殺傷動態(tài)檢測:在使用Calcein AM進行無損、動態(tài)實驗的過程中,我們在第0小時和第6小時獲取同-96孔板(顯示于下側(cè))的圖像。Celigo圖像證實:在同一孔中,Calcein AM陽性活腫瘤細胞的數(shù)量從11,381減少到1,635。
NK細胞介導(dǎo)的細胞毒性對靶細胞的影響
對calcein AM陽性活細胞進行計數(shù),以測定共培養(yǎng)細胞中雙功能融合蛋白(M7824)對NK細胞介導(dǎo)的細胞毒性的影響。
使用TGF-B1和IFN-Y對靶細胞A549進行預(yù)處理,使用calcein AM(CAM) 進行染色。將NK細胞從PBMCS中分離出來,與A549細胞共培養(yǎng)。
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通過成像對共培養(yǎng)細胞進行細胞毒性分析
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測定特異性裂解率
在復(fù)雜的共培養(yǎng)體系中追蹤雙特異抗體誘導(dǎo)的細胞毒性
Celigo對胎兒細胞(CellTrackerGreen染色)和HER2敲除細胞(CellTracker Violet染色)的共同培養(yǎng)體系進行直接計數(shù)。該實驗研究了單價雙特異lgG(DuetMab)對胎兒細胞和HER2敲除細胞共培養(yǎng)體系的選擇性細胞毒性作用。
l對懸浮細胞和貼壁細胞基于transwell實驗的趨化作用、細胞侵襲和細胞遷移進行成像和定量。
小室(A)內(nèi)的懸浮細胞穿過多孔膜,朝著孔板下層的化學(xué)誘導(dǎo)物遷移。包被了ECM的小室(C)上的貼壁細胞侵襲并遷移到膜的另一側(cè)。Celigo可自動對遷移的懸浮細胞和貼壁細胞(B、D)進行成像和計數(shù)。
劃痕實驗:成像和定量
在多個時間點,對整個孔進行成像。成像的同時,軟件會自動計算每個孔中的細胞融合率。
采用直接細胞計數(shù)法,監(jiān)測生長抑制情況
劑量依賴型生長抑制
生成的圖像(顯示于左側(cè))來自兩個孔:B2和B10;之后分別按照33.3um和0.005um的劑量對兩個孔進行藥物處理。